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禽流感病毒A/PFV/Restock/34(H7N1)HA基因在昆虫/杆状病毒系统中的表达_论文

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维普资讯 http://www.cqvip.com 第2卷 第3 8 期  20 年 06 5 月  中 国 预 防 兽 医 学 报  V0.8 No3 【 . . 2   M a  2 0   v 06 Chn s o r a  fP e e t eVeeiay M e iie iee J u l   rv ni   tr r  dcn   n o v n 禽流感病毒A P VR s c/4H N ) A 因 / F / et k ( 7 1 H 基   O 3 在 昆虫/ 状病 毒 系统 中的表 达  杆 李  贺 ,孟庆文 ,冉 多 良 ,于康震      ,陈化 兰 ,李永强  ,吴 东来    一 (. 1 中国农 业科 学院哈 尔滨 兽医 研究所 兽 医生 物技 术 国家重点 实验 室 ,黑 龙江 哈尔 滨 100 ;2 新疆 农业 大学 动 物医 学院 ,新疆  501 . 乌 鲁木 齐 8 0 5 ) 3O 2   摘  要 :经 R .C TP R扩 增 了 禽 流 感 病 毒 A P VR s c/ 3 H N1 1   b H /F /et k1 4( 7 1 . k  A基 因 的e N o /   7 D A,将 其 克 隆 到  p MD1. 中并测序 。在 去除编码H 信 号肽的核 苷酸序列后 ,亚克 隆到杆 状病毒 转移栽体p l B c i,筛选到 重  8 T A Bu aH s e 组质粒命 名为p l B c i 7 ,测序正确后 与线性化 的杆 状病毒D A ( a. . l T D A)共转 染S Bu aHs H e HA N B c BuM N N e t 9昆虫细胞 ,   挑取蓝 色蚀 斑,经三轮蚀斑 纯化 ,获得数株重组杆状病毒rBuHs 7 A。提取重组病毒D A,经P R pl i H e H N C 证明 目的基  因片段 已插入到杆 状病毒基 因组中,血凝 实验 、S SP G 和We e  l 实验 结果表 明H 基 因在重组杆状病毒 感 D .A E s r bo tn t A   染的H i 细胞 中获得 了表达 。 Fv e   关键词 :禽流感病毒 ;血凝素基 因;重组杆状病毒 ;表达  中图分类号 :¥ 5 .5 . 826  5 9  文章标识码 :A   文章 编号 :10.5920 )309 .   0 8 8(060.240 0 4 Ex r s in o   va  n le z   i s p e so   fa in if n a vr   u u A P V R s c/4 H N ) A g n     c mbn n b c l i s / F / e t k ( 7   H  e ei r o i t a u v u  o 3 1 ne a  or L   , NG Qigwe , A D ol n 2 YU K n -hn , HE   u - n, I He ME   n - n R N  u -a g ,   a gz e   C N H al   i a   L   n - in   . U  n -a  IYo g q a g ' W _ Do g li ( . t nl yL b rtr f tr ayBoeh ooy abnVeeiayReerhIstt, hn s  a e  fA r utrlSine, ri  1 Nai a Ke  aoaoyo  e nr  itcn lg ,H ri  t n r  sac ntue C ieeAcdmyo  gi l a c cs Habn o   Ve i r i cu   e 10 0 , hn ;. eat n  f tr ayS i c , i a gA r utrl iest,U u h 3 0 2 C ia  5 0 1 C ia2 D p r to  ei r ce e X  ̄i   gi l a Unv r y rmci 0 5 , hn ) me Ve n n n cu   i 8 Ab ta t h   o lme tr   src :T e c mpe n ay DNA  f 17 k   o   .  b HA  e ewa  rp rd fo te e g n   sp e ae  r m h   DNA  y RT-CR.T e a l e  rg n  b  P h   mpi d f me t i f a wa   l n d it   h   ls d v co   M D  ?   n   h n s q e c d s co e   n o t e p a mi   e t r p 1 T a d t e   e u n e .Th   e u n e c d n   f sg a  e t e H   s d lt d h e     8 e s q e c   o i g o   in lp p i   d A wa   e ee ,t n s b ln d it  e d wn tem  fte b c lvrsta se  e trp u Ba Hi ta  o ti h   o e b e meii  ert n sg a. u co e  no t   o s a o     auo iu  n frv co  Ble c sh tc nan teh n y e  l n scei  in 1 h r h r   R o   T e rc mbn n  a se  e trwa  ce n d a  a d m  y pc ig c lne  n   e in td p HiH7 h   e o ia tt n frv co  s sre e   tr o b   ikn   oo is a d d sg ae   B s H .Th   BHi HA  s r n A ep



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